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5.1固相萃取柱
固相萃取柱是Z为经典的固相萃取装置。市场**行的SPE产品是以固相萃取柱为主。如下图中的左图所示,常见的固相萃取柱是以聚乙烯或玻璃为材料的注射针筒型装置,针筒内上下装有两片以聚丙烯或玻璃纤维为材料的滤片,中间装有yi定量的吸附剂。这种SPE柱外形均为直筒型,上部敞开。这种SPE柱即可用于手工操作,也可用于自动化操作。为了方便手工操作,一次性加入体积较大的样品(15 mL ~20 mL),一些厂商生产了大容量固相萃取柱(下图右),SPE柱的吸附剂及滤片部分的尺寸与经典的SPE柱相同,属于直筒型的,但其承受液体的部分则是漏斗型的,以便一次性载入更多的液体样品。前者在手工及自动SPE中都能使用,后者由于外形不规范,多用于手工SPE操作。根据填料上部的空间体积的大小,商品化的SPE柱可分为1 mL、3 mL、6 mL的规格,也有8 mL、12 mL甚至更大尺寸的SPE柱。大量使用的为1 mL、3 mL及6 mL SPE柱。8 mL以上的SPE柱主要用于一些比较特殊的应用。另外一种常见的手工SPE柱是其上下两端都是直径很小的管状开口。这种萃取柱也称为固相萃取筒(SPE cartridges)。这种萃取装置需要与针筒连接使用,一般用于简易的手工操作。
5.2固相萃取膜片
与经典的硅胶基质固相萃取柱不同,薄片型萃取柱(Extraction disk)采用的是聚合树脂为基质。将相关的功能团键合在聚合树脂制成的薄片上,然后装填在与经典固相萃取柱相同的针筒型萃取管中,如下图所示。其中比较典型的就是美国J.T. Baker公司生产的Speedisk。与传统的硅胶基质的固相萃取柱比较,采用聚合树脂的Speedisk薄膜型萃取柱有很好的刚性及更大的表面积。适合在pH 1-14的范围使用。另外,这种新型的聚丙烯薄膜型固相萃取柱洁净,使用于对样品洁净度要求高的检测手段使用。Speedisk薄膜柱使用的溶剂量要少很多,而且每克担体的容量则比传统的固相萃取柱要大很多。
薄膜型固相萃取柱的容量取决于担体的类型、重量、样品基液的性质、样品的体积以及担体对分析物的亲合力等因素。一般平均为担体重量的5%。
SPE固相萃取技术(固相萃取仪器装置)(七)使用薄膜型SPE柱有几个显着的优点
1.提高检测灵敏度 在经典的SPE柱中,洗脱液的体积对于1 mL SPE柱 (100 mg)来说一般是0.5 – 1 mL;对于3 mL SPE柱 (500 mg) 是1 – 1.5 mL;6 mL SPE柱 (1 g) 为2 – 3 mL。而对于典型的薄膜型SPE柱,1 mL柱大约为150 μL; 3 mL柱为300 μL;6 mL柱为500 μL。在载样量相同的情况下,使用薄膜型SPE柱由于Z后的洗脱液体积减少使得实际浓度在没有浓缩的情况下比经典SPE柱增加了5倍。
2.减少样品体积 在痕量分析中,为了得到足够的分析物浓度以满足检测灵敏度,往往需要萃取大体积的样品。如在水中农药残留物的分析中,经常需要使用250 mL – 1000 mL的样品,有时甚至需要更大体积的样品量。大体积的样品往往会给SPE带来不利因素。先,如此大体积的样品过SPE柱是费时的工作;其次,如此大体积的样品通过SPE柱往往会改变SPE柱的动力学键合环境,使得痕量的分析物不能被SPE柱吸附。解决这个问题Z好的方法是采用薄膜型SPE柱。由于使用薄膜型SPE柱所需的洗脱液体积少,在保证相同的检测灵敏度时可以减少样品的体积。
3.用HPLC流动相进行洗脱避免浓缩步骤 当使用反相SPE柱时,一般做法是用溶剂洗脱分析物,然后再进行浓缩/再溶解进样分析。使用薄膜型SPE柱则可以直接用小体积的HPLC流动相进行洗脱直接在线进行HPLC分析。这样可有效防止热不稳定分析物的损失。
固相萃取膜(Extraction membrane,Extraction disk)主要由美国3M公司生产。包括J. T. Baker, Varina等其他公司的萃取膜都是来源于3M公司。固相萃取膜是将微小的填料颗粒固定在由聚四氟乙烯(PTFE)纤维组成的基质中,其中重量的90%是填料,10%是的形状与我们常用的过滤膜相似,主要规格有直径为47 mm、50 mm及90 mm几种。
由于固相萃取膜表面积比市面上任何萃取柱的表面积都大很多、流速快,所以用于处理大体积样品。如自来水,环境水等。
由于这种萃取膜比经典的固相萃取柱要薄许多,所以具有以下优点:
减少溶剂及样品体积
高通量
洗脱体积小
可以较少或省略浓缩步骤
样品可以以Z大的流速通过萃取膜,而不会形成渠沟
稳定的回收率
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