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3联细胞过滤器 不锈钢检测仪 CYW-300B 微生物限度检测仪
微生物的检测,无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义,本文对生长量测定法、微生物计数法、生理指标法和商业化微生物检测简要介绍了利用微生物重量,体积,大小,生理代谢物等指标的二十余种常用的检测方法,简要介绍了这些方法的原理,应用范围和优缺点。
一个微生物细胞在合适的外界条件下,不断的吸收营养物质,并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度**过了异化作用,则其原生质的总量(重量,体积,大小)就不断增加,于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长,即各细胞组分是按恰当的比例增长时,则达到程度后就会发生繁殖,从而引起个体数目的增加,这时,原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长,就引起了这一群体的生长,这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其他生物的生长,微生物的个体生长在科研上有困难,通常情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的,因此,微生物的生长通常指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标,同时,微生物在生产实践上的各种应用或是对致病,霉腐微生物的防治都和他们的生长抑制紧密相关。所以有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加,所以测定的方法也都直接或间接的以次为根据,而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量,可以从其重量,体积,密度,浓度,做指标来进行衡量。
1. 微生物计量法
1.1 体积测量法
又称测菌丝浓度法,通过测定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是,取量的待测培养液(如10 mL)放在有刻度的离心管中,设定的离心时间(如5 min)和转速(如5000 rpm),离心后,倒出上清夜,测出上清夜体积为v,则菌丝浓度为(10-v)/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放,简便,快速,但需要设定一致的处理条件,否则偏差很大,由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物,结果会有偏差。
称干重法
可用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10~20%。在离心法中,将体积待测培养液倒入离心管中,设定的离心时间和转速,进行离心,并用清水离心洗涤1~5次,进行干燥。干燥可用烘箱在105 ℃或100 ℃下烘干,或采用红外线烘干,也可在80 ℃或40 ℃下真空干燥,干燥后称重。如用过滤法,丝状可用滤纸过滤,可用醋酸纤维膜等滤膜过滤,过滤后用少量水洗涤,在40 ℃下进行真空干燥。称干重发法较为烦琐,通常获取的微生物产品为菌体时,常采用这种方法,如活性干酵母(Activity Dry Yeast, ADY),一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。
蛋白质芯片技术又称蛋白质阵列,是指将已知的大量蛋白质固定在经化学修饰的固相载体上,在保留蛋白质物化性质的基础上,蛋白质与载体表面结合,再用激光扫描系统或者电感耦合器件获取相关图像;然后用专门的计算机软件分析图像、定性定量结果。Howell等采用俗称软蚀刻的微接触印刷技术制作出了一种可以大肠杆菌E.coli O157∶H7及鲑肾杆菌的抗体微阵列,结果表明:此芯片与其他有害微生物的交叉反应少,检出浓度为7×107cfu/ml,检测时间是40min,是一种很有效的微生物检测方法。
方珍建立了检测E.coli O157
H7的液相蛋白芯片方法。通过绘制检测曲线,分别应用该方法及H2O作溶解剂的液相芯片方法检测实际牛肉样品。比较该方法与分离培养法的阳性检出率,能检出阳性的低浓度为103cfu/ml,低检出限为100cfu/ml;与18种肠道菌无交叉反应,特异性良好;3次重复实验,批间变异系数7.61,重复性良好;应用该方法检测牛肉样品中人工添加,能检出阳性的低浓度为0.5cfu/ml;应用该方法检测154份实际牛肉样品,检出阳性样品19份,而培养法检出阳性样品16份。蛋白质芯片技术是一种高特异性、高灵敏度、高通量、重复性好、应用性强、适用范围广且微型化的分析技术,在生命科学的各个研究领域有很好的发展前景,但同基因芯片技术一样,费用高,发展还不成熟。
纳米金标记技术
纳米金标记技术是指直径在1nm—100nm金的微小颗粒,具有高电子密度,介电特性和催化作用,可以与多种生物大分子结合,且不影响生物大分子的生物活性。近年来,基于纳米金标记的检测研究在有害微生物方面应用比较多,检测的微生物种类也比较多,国内外科技工作者通过对纳米金颗粒表面特性的处理以及在纳米金颗粒表面标记上特定的寡核苷酸探针,开发研究出了新的微生物系统。
1.一体化**小型设计,减小了对层流台操作空间的占用。
2. 滤膜预先,即拆即用,降低污染源。
3.过滤杯采用唇形密封设计,不使用夹钳和 O 型圈,无泄漏操作和均匀的微生物回收率
4.可同时抽滤多张滤膜。
5. 滤杯多种规格可选,有一次性PP滤杯,反复使用的玻璃滤杯和不锈钢滤杯,操作方便。
6.每个滤头均可单孔单控制,方便操作人员灵活使用。
7.无油真空泵设计,噪音低。
8.仪器表面经镜面处理,便于清洁和。
9.过滤头可以火焰,方便连续实验操作;
10. 配有内置隔膜液泵,不需外接抽滤瓶,液体直接通过隔膜液泵排除,减少了抽滤瓶使用上的繁琐
11.已氧化的美观的把手分布基座两端,加强整体稳固;
12.稳固的低重心设计使其不会因溶液满载而发生翻倒。