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一次性薄膜过滤器 纯水检测仪 ZW-808A 智能集菌仪
集菌仪是集菌培育器的配套运用仪器,经过集菌仪的定向活动加压作用,口罩被过滤并在滤器内进行培育,以查验口罩是否含菌。检测口罩进程:口罩经过进样管道连续被注入集菌培育器中,使用集菌培育器内构成的下压,经过0.45微米孔径的滤膜过滤,口罩中可能存在的微生物被截留搜集在滤膜上,经过冲刷滤膜除掉口罩的抑菌成分。然后把所需培育基经过进样管道直接注入集菌培育器中,放置规则的温度培育,调查是否有长菌现象。广泛适用于用无菌制剂的无菌,包括类及含有抑菌成份的药品、大输液、水、医疗器具、无菌用水等,也可用于食物、饮料职业等微生物限度查看。
微生物限度检验的集菌仪(反复使用培养器)SOP纯化水、用水、上清液、口服液等的薄膜过滤方法
1.取滤膜(直径50mm)N张,浸泡在纯化水里约5分钟
2.用镊子取出滤膜,平贴在不锈钢网片上,将不锈钢网片放入不锈钢底
座里,放入垫片和O型圈,将螺盖和杯体盖紧组装成一套完整的全封闭过滤培养器。
3.,用牛皮纸将组装好的培养器包好,放入高压湿热锅里进行(按照2005年中国药典)的规定进行。
4.取好的培养器至微生物限度检定室,进行集菌过滤。
5.打开配置好的固体培养基,将集菌好的滤膜平贴在培养基上(滤膜上不可以有气泡产生)。
6.按照中国药典的规定进行培养。
注意:
1.液层高度的控制方法:取下滤器**部胶帽,向滤器内泵入冲洗液,冲洗液至适宜高度时,套上胶帽
2.冲洗时,若出现滤膜上无液层覆盖现象,说明滤器内气压过高,取下胶帽放气,然后套上。
3.应保持双芯针头空气过滤器内滤膜的干燥,可确保气流畅通。
4.根据样品性状,控制集菌仪适宜转速,以进液管不出现气泡为宜。若进液管出现气泡,降低转速即可避免,否则应检查针头是否被堵塞。
5.为便于操作,推荐选用带胶塞的500ml玻璃瓶作稀释容器
细菌总数计数的研究已有很多,目前国标规定的方法为平板计数法,该方法是将样品加入琼脂营养基,在37 ℃下培养24~48 h后计数。这种方法精度高,但耗时长,难以满足实际工作需要。为了简化检测程序、缩短检测时间,国内外学者进行了大量的检测方法的研究,提出了阻法〔1〕、Simplate TM全平器计数法〔2〕、微菌落技术〔3-5〕、纸片法〔6-7〕等检测方法,取得了的成果,但检测时间仍在4 h以上。
本研究在分析了已有研究成果的基础上,提出了在滤膜上染色后,直接计数的细菌总数检测方法,具体步骤为:用集菌仪进行细菌收集→在膜上进行染色→在油镜下计数→按公式计算出菌液浓度。实验结果表明,该方法与传统的平板培养法无显著性差异,检测时间约1 h,是一种快速的细菌总数方法。
2 材料与方法
2.1 材料
本研究中用的试验材料有集菌仪(杭州泰林生物技术设备有限公司),染色剂,生物显微镜(宁波永新光学股份有限公司),聚碳酸脂膜(直径47 mm)。
2.2 实验方法
2.2.1 准备工作 卸下集菌仪的滤网(见图1),统计滤网上小孔总数,为计算菌液浓度做准备。另外,还需对集菌仪中的集菌器进行高压,以防止过滤过程中引入外源细菌。
2.2.2 细菌收集 取浓度的霉菌菌液300~500 ml,装在集菌仪上,集菌仪采用蠕动加压方式对菌液施加的压力,使菌液流过孔径为0.45 um的聚碳酸脂膜。采用过滤方法是因为它可以使细菌相对均匀地分布在滤膜上,而选用聚碳酸脂膜是因为这种膜具有良好的透光性,便于用显微镜观察。
2.2.3 染色 集菌后取下滤膜,切下一部分放在载玻片上,进行染色、固定。染色的目的是增大细菌与背景的对比度,便于观察。
2.2.4 显微镜计数与计算 菌液经集菌仪过滤后,细菌在滤膜上的分布见图2、图3,由图可以看出细菌分布具有以下两个特点:一是细菌集中在一个个的圆形区域内,这些圆形区域和挡板的小孔相对应;二是各个圆形区域之间细菌很少。根据膜上细菌分布的这种特点,提出以圆形区域为单位进行计数,统计出圆形区域内细菌的平均个数,从而计算出菌液中细菌总数。具体步骤如下:随机选择10个圆形区域,在油镜下,调节焦距以获得较清晰的图像(见图4),统计每个圆形区域内的细菌个数,然后按公式(1)计算出菌液的浓度。
X=A10×N/V(1)图2 膜上细菌的区域分布
Fig 2 The distributing region of bacteria on the filter(100倍)
图3 膜上细菌的区域间隔
Fig 3 The space among the distributing regions(100倍)
图4 膜上细菌染色后图像
Fig 4 Figure of bacteria after coloration(1 000倍)
式中:X表示待检菌液浓度(CFU/ml)
A表示10个圆形区域内细菌总数
N表示滤网上小孔总数
V表示集菌时所用待检菌液体积(ml)
1.新型泵头:偏心张紧固定法,操作方便快捷。
2.智能集菌仪的传动系统采用低转速大力钜电机,直接驱动,从而降低了输入功率和机身表面的温度,噪音在50db以下。
3.蠕动泵具有安全保护装置,打开动快自动停止运转,避失误对人的伤害。
4.整机采用L304不锈钢一体化**小型设计,减少操作台的占用空间。
5.转速控制采用无极旋转调速法控制,操作简单直接,有暂停记忆功能。
6.脚踏开关采用进口航空防水端头连接,**低电压控制电器,不会存在漏电伤人的危险
7.机壳表面经镜面处理,便于和清洁。
8.排液槽有分体式和连机旋转式可选。
9.机身所有安装口端经过防水密封处理,有效的防止液体渗入机内。
10.可根据客户需求,增加检品回收功能,可自由拆装回收支架,满足昂贵检品的回收和产品的特殊需求。