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细胞分类计数器 TYJS-I 10种计数法 多功能分类计数机 数字显示
传统的菌落计数器使用时,是将计数笔连接到主机上,打开电源开关,将培养皿放在白光板上,打开白光灯,用计数笔触动计数,LED显示屏显示所计数量;计数完成可用计数笔在稿纸上暂记总数,重新开关电源,LED显示屏自动归零,二次计数与稿纸上一次总数比较,数量相同可得较准确的结果。同时,按照细菌计数检验规程规定,一只培养皿中细菌生长数过300个时,应将检验样品稀释重作,以保证计数的准确性,所以,一般的菌落计数器仪器显示计为三位数。
多功能血细胞计数器是由数字处理芯片、集成电路,以及显示屏、按键组成,与各种显微镜配合使用,由微电脑进行自动分类计数的数字化产品,能对骨多功能血细胞计数器髓细胞、外周血细胞、小巨核细胞进行的分类计数并自动计算出各项指标,能对细胞化学染色后的积分进行计算,并兼有常用的四则运算。
细胞计数器的有哪些?每个的特点是怎样的?细胞计数器哪家?这是很多购买者想了解的内容,在此特做一些指南,以供大家购买的时候进行参考。
然后要考虑细胞计数器的整体性价比。需要考虑两个方面的价格,一是机器本身的价格,二是耗材价格。国外机器的价格比国内的贵,耗材也很贵,有十几块,贵的二十几块。国内的机器在这一块来讲,性价比还是不错的,性能好,耗材也的多。
考虑便捷性。有的机器需要外带主机操作,这就显得累赘;有的机器小巧但是是手轮调焦,可能对于想使用自动调焦的用户来说又美中不足了。目前有一款国内一体机形式的细胞计数器,还能自动调焦。
考虑功能需求。现在市面上有一般计算细胞总数、细胞活率、细胞浓度的机器,有荧光通道的计数器,要是想实现细胞分选则是需要另外的功能机器,就不是简单的细胞计数了。而且细胞计数器是队培养细胞进行计数,如是非培养细胞则又是需要另外的机器。
考虑计数模式多样性。现在的细胞计数器一般都是使用台盼蓝染色计数,仅有一款机器能够在不使用台盼蓝的情况下也能进行细胞计数。
市场上近几年涌现出不少自动细胞计数器。这种仪器利用光学显微镜技术,但带来了高的准确性、重复性,并将这一单调的工作自动化。样品体积小也是这种细胞计数器的额外优势。许多仪器使用一次性的玻片,只需要10-20 uL样品。将玻片插入自动细胞计数器中,照相机捕获图像。随后内置的软件分析图像,显示细胞数量等信息。
在此,介绍了使用自动细胞计数器的三个tip。
准确对焦
与其他光学显微镜一样,仪器的准确对焦对于计数很关键。在手动计数时,训练有素的大脑可轻松鉴定细胞。然而,自动细胞计数器内的照相机检测活细胞的亮和暗边缘,将其处理成黑白像素信息。如果细胞未准确对焦,那么亮将有明显的灰度,会被误认为是死细胞。
大部分研究人员将会发现对焦并不难,只要显示在屏幕上的图像质量与传统的显微镜相似。确保你有一张清晰的图像,这很重要。另一点是要了解细胞计数器中照相机的分辨率。如果自动细胞计数器以低的帧速显示,如每秒小于15帧,那么显示的图像将不能实时响应聚焦旋钮的微调。
控制玻片之间的差异
大部分基于图像的自动细胞计数器都使用一次性的玻片,其上有明确的测量区域。这一测量区域被物镜的放大率和照相机的图像传感器大小所设定。这些细胞计数器通常测定0.4-0.5 uL样品,相当于血球计数器的4-5个大方格。
与血球计数器不同,计数玻片通常只使用一次。因此,玻片之间的差异会显著影响细胞计数的结果。对于某一组实验,好使用同一批号的玻片,尽量避免这些差异。在换批号时,也建议用标准的微珠来检验玻片。大部分细胞计数器制造商都提供已知浓度的标准微珠。使用相同的微珠样品来检验不同的玻片,将有助于发现差异。
评估软件的分簇性能
自动细胞计数器的是开展分析的软件,它相当于手动计数时的人脑。大部分的自动细胞计数器包含集成软件,能准确地计算单细胞群体的数量。然而,在谈到成簇细胞的计数时,细胞计数器就会存在明显差异。由于从培养细胞中获得的样品并不总是单细胞群体,因此,有时会有多个细胞团块,而自动细胞计数器的分簇(declustering)性能也仔细评估。评估分簇性能时可开展图1的检测。
图1. 将HL-60细胞加热到70°C,处理20分钟,细胞,获得死细胞样品。随后利用两款不同的自动细胞计数器进行样品的检测。在细胞计数之后,根据软件捕获的图像进行比较。红色圆圈:死细胞;蓝色圆圈:活细胞;黑色圆圈:排除的对象。