方形固相萃取仪 CYCQ-24D 负压 耐腐蚀固相萃取装置

方形固相萃取仪 CYCQ-24D 负压 耐腐蚀固相萃取装置

1.尽量慢。
我们在用固相萃取仪时，面临的一个问题就是:液体应该以什么速率过柱流出，我的经验是，要想效果好，就要慢，尽量慢。.
对于固相萃取仪柱中的填料，我们如果局部放大地看，能够看到其实它们是有很多的空际，液体流通的渠道很多，如果流得快，相当比例的待测组分还来不及与填料充分作用就地从通道流失;所以要慢，给它们一个充分作用的机会。
如何慢呢?一个窍门就是不要用配合抽气机使用的所谓固相萃取仪器，而采用再普通不过的重力法。利用重力的作用使液体向下流出。在实验速度上，重力法远不如吸力法，但是在实验效果方面，重力法远比吸力法优胜，用吸力法只能得到谱带吸附，用重力法却能得到柱头吸附，在速度和效果两者的平衡中，我们还是倾向于**保证好的效果。
举例来说，一个3ml500mg的C18小柱，如果加甲醇活化，其甲醇全部流至筛板时间约为20分钟，而在过样品液时，25ml 的液体*多2小时可以流完，而且用重力法如果得当，工作速率不比吸力法差很多。因为我们可以充分利用空闲时间，用吸力法*须有人在旁边守候，而重力法由于不需要用电，可以充分利用午休和晚上时间过柱，液体量大时接个堆叠接头和延长管即可，安排好实验步骤，工作效率一样很高。另外，重力法不需要抽气机和固相萃取仪器。
2.尽量少。
在固相萃取仪条件选择上，有人为了提高提取效率，尽量多加液体，或选择填料量大的小柱，我觉得大可不*如此。尤其在用重力法时，由于效率高，很多情况下是柱头吸附，并不是所有的填料都在起作用，填料多了不仅液体流出速度会更慢，而且在洗脱时的扩散会很明显。
n. com因此建议，够用就行，在能保证效率时，填料尽量少，加液也不宜多。
3.实验条件不宜过分细化。
固相萃取仪从原理上是色谱分离，但是在操作时*好只把它作为吸附萃取剂使用，由于填料性质、松紧常有差异，因此在实际实验中不*因为追求效果的*佳化而设计出很复杂的洗脱程序。
在建立条件中，我们应该尽量多利用现成的资料，尽快地建立起体系，同时要对操作过于复杂的步骤保持警惕性，在实验效果，实验速率和易操作性三者中取得平衡点。

当目标化合物是弱酸性或弱碱性化合物时，就应该注意环境的pH。
当用非性机理进行固相萃取时（如使用C18 SPE柱），要调节环境的pH，以保证目标化合物呈中性状态而被SPE柱的非性官能团（例如：C18）吸附。要保证目标化合物99%以上呈中性状态，就要根据目标化合物的pKa来调节pH。根据pKa的基本定义中的公式（3）和（4）可知，环境的pH应该至少比目标化合物pKa低两个pH单位。
当用离子交换机理进行固相萃取时（如使用阳离子交换柱或阴离子交换柱），在吸附时（样品过柱）要调节pH，以保证99%以上的目标化合物呈离子状态，根据pKa的基本定义中的公式（3）和（4）可知，对于弱酸性化合物，吸附时的pH值应该调节到至少**该酸性化合物pKa两个pH单位，在洗脱时，要保证99%以上的弱酸性化合物呈中性状态，就要调节pH至少低于酸性化合物两个pH单位；对于弱碱性，则与弱酸性化合物相反，在吸附时，环境的pH应该比弱碱性化合物pKa低两个pH单位，而洗脱时，pH至少要比弱碱性化合物高两个pH单位。
例如，的pKa=9.61。在用阳离子交换固相萃取对（弱碱性化合物）进行萃取时，环境的酸碱度应该调节到pH 7.61以下。在此pH条件下，99%的呈阳离子状态，被阳离子交换树脂吸附；洗脱时，应该调节到pH 11.61以上。此时99%的转化为中性状态，很*被洗脱溶剂从阳离子交换柱上洗脱下来。
12.2固相萃取中的lg Kow(辛醇-水分配系数Kow)
**化合物的正辛醇-水分配系数（Kow）是指平衡状态下化合物在正辛醇和水相中浓度的比值。它反映了化合物在水相和**相之间的转移能力，是描述**化合物在环境中行为的重要物理化学参数。通常用其对数值Log Kow来表示, 也称为Log P (疏水常数)。分配系数的数值越大，**物在**相中溶解度也越大，即在水中的溶解度越小。
Log Kow可以通过实验测定，也可以按yi定的公式进行估算。在许多化合物理化手册或文献中和可以查到。
SPE固相萃取技术十（固相萃取仪器装置）

7. 固相萃取参数的优化
在建立了初步的固相萃取方法后就可以用空白样品添加目标化合物后对添加物进行萃取。然后，根据分析结果对初步的固相萃取方法进行优化，以达到Z佳的效果。优化过程主要考虑的因素有：
回收率是否达到检测要求？
能否将萃取过程缩短以提高效率？
能否将溶剂使用量减少以节省成本、提高效率、减少污染？
如果检测结果发现回收率较低，应该先检查整个操作过程是否有错。如果没有，就要从方法本身查找原因了。可以从以下几个方面着手检查：
1. 洗涤溶剂是否合适
－ 理想的洗涤溶剂是溶于基质，但对目标物溶解度低。
2.目标化合物是否没有洗脱
－ 选择更强的洗脱溶剂（如改变pH、离子强度、**溶剂%含量）
－ 选择作用力相对较弱的SPE柱
3.目标化合物是否没有被吸附
可以采用原萃取方法以双柱叠加的方式将两个性质相同的固相萃取柱串连在一起进行柱子预处理及样品添加操作，然后将两根柱子分开，分别对两根萃取柱洗脱。如果在下方的柱子上发现有目标化合物就表明目标化合物在萃取过程发生了穿透。也就是说目标化合物在样品添加过秤中没有按照方法设计要求不很好地吸附。有部分目标化合物在样品添加过程中随样品基质穿过固相萃取柱。发生穿透的原因可能是：萃取机理选择的不合适；固相萃取柱的吸附容量不够。目标化合物没有被吸附还有另外一种可能性就是对于某些样品来说，由于部分目标化合物没有呈游离状态。如生物样品中的目标化合物与蛋白质结合在一起，所以随着样品基质通过固相萃取柱。
4、目标化合物与固相萃取填料功能团之间的吸附作用过强
洗脱溶剂的洗脱强度不足以将目标化合物全部洗脱下来。这种情况可以改用吸附力较弱的固相萃取柱或改用洗脱强度更大地溶剂进行洗脱。
在达到预期回收率的前提下，我们希望萃取过程越短越好。提高效率可以从以下几个方面入手：
1、提高流速。包括预处理溶液流速、样品过柱流速。
2、减少洗脱溶液的体积
放射性同位素法优化固相萃取参数
在有条件的实验室，可以通过放射性标记物来查找回收率偏低的原因，优化固相萃取参数。通过同位素示踪的方法可以快速查出回收率偏低的原因，从而优化固相萃取参数。
统计学方法优化固相萃取参数
应用统计学方法或相关的软件（如：Design of Experiment, DOE）可以减少实验次数，加快固相萃取方法的建立与参数的优化。