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微生物限度检测仪 细胞检测过滤器 CYW-600B 不锈钢检测仪
蛋白质芯片技术又称蛋白质阵列,是指将已知的大量蛋白质固定在经化学修饰的固相载体上,在保留蛋白质物化性质的基础上,蛋白质与载体表面结合,再用激光扫描系统或者电感耦合器件获取相关图像;然后用专门的计算机软件分析图像、定性定量结果。Howell等采用俗称软蚀刻的微接触印刷技术制作出了一种可以大肠杆菌E.coli O157∶H7及鲑肾杆菌的抗体微阵列,结果表明:此芯片与其他有害微生物的交叉反应少,检出浓度为7×107cfu/ml,检测时间是40min,是一种很有效的微生物检测方法。
方珍建立了检测E.coli O157
H7的液相蛋白芯片方法。通过绘制检测曲线,分别应用该方法及H2O作溶解剂的液相芯片方法检测实际牛肉样品。比较该方法与分离培养法的阳性检出率,能检出阳性的低浓度为103cfu/ml,低检出限为100cfu/ml;与18种肠道菌无交叉反应,特异性良好;3次重复实验,批间变异系数7.61,重复性良好;应用该方法检测牛肉样品中人工添加,能检出阳性的低浓度为0.5cfu/ml;应用该方法检测154份实际牛肉样品,检出阳性样品19份,而培养法检出阳性样品16份。蛋白质芯片技术是一种高特异性、高灵敏度、高通量、重复性好、应用性强、适用范围广且微型化的分析技术,在生命科学的各个研究领域有很好的发展前景,但同基因芯片技术一样,费用高,发展还不成熟。
纳米金标记技术
纳米金标记技术是指直径在1nm—100nm金的微小颗粒,具有高电子密度,介电特性和催化作用,可以与多种生物大分子结合,且不影响生物大分子的生物活性。近年来,基于纳米金标记的检测研究在有害微生物方面应用比较多,检测的微生物种类也比较多,国内外科技工作者通过对纳米金颗粒表面特性的处理以及在纳米金颗粒表面标记上特定的寡核苷酸探针,开发研究出了新的微生物系统。
利用氨基偶联法在传感器表面固定多抗体作为一抗,金纳米粒子标记的大肠杆菌E.coli O157∶H7的多抗体作为二抗,通过三明治方法用双通道表面等离子体共振传感器对E.coli O157∶H7进行检测。SPR直接法检出限为103cfu/ml,线性范围为103cfu/ml—109cfu/ml;金纳米粒子增强三明治法的检出限为10cfu/ml,线性范围为10cfu/ml—1010cfu/ml,灵敏度提高100倍,检测范围更宽,检测时间缩短,选择性和重现性较好。此技术具有简单、快速、灵敏度高、特异性强、**、样品所需量少等优点,适合现场筛选,在饲料检测中有着广泛的应用价值和发展前景。
目前,生物学领域的*通过对微生物检测方面深入的研究,开发了一系列技术,有ATP荧光仪、多功能微生物荧光检测仪、微生物实时光电检测系统、纸片法。这些用于食品中有害微生物的检测技术,未来同样可以在饲料中应用,这些方法的应用将为饲料安全提供有力的**,同时可以促进我国饲料工业的持续健康发展。下面重点介绍常用的两种有害微生物检测设备。
微生物检测系统
高性能便携式微生物检测仪将多种检验方法的优点集合应用,如培养皿法、酶法、*法、基因法,具有便捷、操作简单、检验*、高灵敏性、高特异性、消耗、定性半定量测量等诸多优点。
实验准备:取硅胶管一根,将一端套在过滤装置的出液口,另一端套在收集瓶的进液口(不锈嘴);再取另一根硅胶管,一端套在收集瓶的抽气端(白色塑料嘴),另一端通过不锈钢宝塔接头与真空泵相连 (1) 试验前,应先将滤杯清洗干净、晾干、取滤膜(50mm)侵泡到纯化水里3~5min,滤杯及滤膜支撑网备用(可采用火焰器快速)。 (2)用镊子夹住滤膜放在抽滤装置的滤网上。 (3)将其供试品注入过滤杯内,然后启动真空泵,再打开相应阀门,实施过滤集菌。 (4) 供试品过滤集菌结束后(滤膜上没有水珠),关闭真空泵开关,用无菌镊子取出密封圈,在用无菌镊子取出滤膜。 (5)将滤膜贴到事先准备好的培养基上,菌面朝上,平贴,不得有气泡。相应的液体培养基注入滤杯内,培养基覆盖滤膜表面即可。 (6)盖上盖子放置在生化培养箱及恒温培养箱中,按规定温度和时间进行培养,逐日观察、计数。 (7)仪器正常性检测:取600ml~1200ml纯化水,每个滤杯注入100ml纯化水,接通真空泵电源,再分别打开相对应的阀门,实施抽滤(抽滤时间1~5min为正常范围),根据速度将准备好的纯化水加入滤杯中,纯水顺畅地从排液口流出,即视为仪器可正常工作,如果过滤速度过慢或无法过滤,请检查: A.管路连接是否漏气,滤杯密封性是否良好; B.检品是否含有较多不溶性的颗粒,悬浮物等; C.检查不锈钢网片是否堵塞,不锈钢底座出液孔是否堵塞。若属其他原因,请与厂家联系。 (8)清洗:仪器长期没有使用,再次使用前仪器管路应对管路进行,可采用以下剂:
A乙醇 B新洁尔灭 C甲醛 D次氯酸溶液.方法:准备100ml剂、200ml无菌水(不需微孔滤膜); 先将100ml剂过滤,保持3~5分钟,再将200ml无菌水进行过滤,即可完成管路。
(9)注意事项: a.根据供试品性状来选择滤膜材质,过滤前后应保证滤膜的完整性; b.仪器不工作时,请断电; c.不能抽滤强酸、强碱、强氧化剂、强腐蚀等液体; d.当供试品中含有不溶性的颗粒,悬浮物时,可能导致滤膜堵塞影响过滤,应将供试品进行预处理,除去颗粒或悬浮物; e.抽滤前,应确保管道密封性良好.