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固相萃取仪圆形 CYCQ-12B 真空固相萃取仪 实验室固相萃取装置
1.尽量慢。
我们在用固相萃取仪时,面临的一个问题就是:液体应该以什么速率过柱流出,我的经验是,要想效果好,就要慢,尽量慢。.
对于固相萃取仪柱中的填料,我们如果局部放大地看,能够看到其实它们是有很多的空际,液体流通的渠道很多,如果流得快,相当比例的待测组分还来不及与填料充分作用就地从通道流失;所以要慢,给它们一个充分作用的机会。
如何慢呢?一个窍门就是不要用配合抽气机使用的所谓固相萃取仪器,而采用再普通不过的重力法。利用重力的作用使液体向下流出。在实验速度上,重力法远不如吸力法,但是在实验效果方面,重力法远比吸力法优胜,用吸力法只能得到谱带吸附,用重力法却能得到柱头吸附,在速度和效果两者的平衡中,我们还是倾向于**保证好的效果。
举例来说,一个3ml500mg的C18小柱,如果加甲醇活化,其甲醇全部流至筛板时间约为20分钟,而在过样品液时,25ml 的液体*多2小时可以流完,而且用重力法如果得当,工作速率不比吸力法差很多。因为我们可以充分利用空闲时间,用吸力法*须有人在旁边守候,而重力法由于不需要用电,可以充分利用午休和晚上时间过柱,液体量大时接个堆叠接头和延长管即可,安排好实验步骤,工作效率一样很高。另外,重力法不需要抽气机和固相萃取仪器。
2.尽量少。
在固相萃取仪条件选择上,有人为了提高提取效率,尽量多加液体,或选择填料量大的小柱,我觉得大可不*如此。尤其在用重力法时,由于效率高,很多情况下是柱头吸附,并不是所有的填料都在起作用,填料多了不仅液体流出速度会更慢,而且在洗脱时的扩散会很明显。
n. com因此建议,够用就行,在能保证效率时,填料尽量少,加液也不宜多。
3.实验条件不宜过分细化。
固相萃取仪从原理上是色谱分离,但是在操作时*好只把它作为吸附萃取剂使用,由于填料性质、松紧常有差异,因此在实际实验中不*因为追求效果的*佳化而设计出很复杂的洗脱程序。
在建立条件中,我们应该尽量多利用现成的资料,尽快地建立起体系,同时要对操作过于复杂的步骤保持警惕性,在实验效果,实验速率和易操作性三者中取得平衡点。
4.只用一次
固相萃取仪柱*好只用一.次。因为从严格的意义上来说,很多物质的吸附是不可逆的,一次吸附, 无法洗脱,影响着下一次吸附,虽然有人做过重用的实验,但是总体来说为了节省- -点经费而大大增加了的不可靠性和不确定性,是很不合算的行为。
一、固相萃取概念及基本原理:
固相萃取仪是从八十年代中期开始发展起来的一项样品前处理技术。由液固萃取和液相色谱技术相结合发展而来。固相萃取仪是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和富集目标化合物的目的(即样品的分离,净化和富集),目的在于降低样品基质干扰,提高检测灵敏度,其应用于各类食品安全检测、农产品残留监控、医药卫生、环境保护、商品检验、自来水及化工生产实验室。
固相萃取的基本原理和方法:
固相萃取技术基于液-固相色谱理论,采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进行富集、分离、纯化,是一种包括液相和固相的物理萃取过程;也可以将其近似的看作一种简单的色谱过程。
固相萃取是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理。较常用的方法是使液体样品通过一吸附剂,保留其中被测物质,再选用适当强度溶剂冲去杂质,然后用少量良溶剂洗脱被测物质,从而达到快速分离净化与浓缩的目的。也可选择性吸附干扰杂质,而让被测物质流出;或同时吸附杂质和被测物质,再使用合适的溶剂选择性洗脱被测物质。
二、固相萃取方法的优点:
固相萃取仪具有无可比拟的优势:
优点:*特殊装置和材料
优点:操作简单,*特殊装置
优点:
1.集样品富集及净化与一身,提高检测灵敏度的方法
2.比液液萃取更快,节省溶剂
3.可自动化批量处理
4.重现性好
三、固相萃取装置及基本操作步骤:
1.固相萃取柱
(1)SPE小柱
关于固相萃取小柱:
a.常见的固相萃取柱分为三部分:医用聚丙烯柱管,多孔聚丙烯筛板(20μm)和填料(多为40-60μm,80-100μm)
b.常见规格:100mg/1ml,200mg/3ml,500mg/3ml,1g/6ml等。以100mg/1ml为例,其中100mg
为填料的质量,1ml是空柱管的体积。
c.一次性使用:为避免交叉污染,保可靠性,SPE小柱通常是一次性使用的。
2.固相萃取装置
(1)真空SPE装置组成:玻璃缸,真空压力表,真空泵,真空缓冲瓶,收集管架,小柱连接头,大体积取样器,12位或24位防交叉污染装置。
a、标配StopCock阀,控制流速
b、试管架高度可调,满足不同体积需要
c、压力表放空阀侧面设计,使用方便
d、设计紧凑、经久耐用、性价比高
3.基本操作步骤
针对填料保留机理的不同(填料保留目标化合物或保留杂质),操作稍有不同。